👉 Mit jelent a citotoxicitási vizsgálat?
A citotoxicitási vizsgálat az ISO 10993–1 szabvány szerint:
„A sejttenyésztési technikákat alkalmazó citotoxicitási vizsgálatokfelhasználhatók az orvostechnikai eszközök, anyagok és/vagy kivonataikáltal a sejtekre gyakorolt hatások, például sejtelhalás (pl. sejtlízis), asejtnövekedés gátlása, kolóniaképződés stb. meghatározására. Az ilyenvizsgálatokat az ISO 10993-5 szabványnak megfelelően kell elvégezni.”
A citotoxicitási vizsgálat az orvostechnikai eszközök és anyagoktoxicitásának meghatározására szolgál. A vizsgálatot minden olyanorvostechnikai eszközön elvégzik, amely érintkezésbe kerül a betegekkel,illetve az alapanyagokon és a tisztítás validálására kerülő eszközökön. Acitotoxicitási vizsgálat során azt vizsgálják, hogy egy anyag befolyásolja-eaz élő sejteket. Az orvostechnikai eszközök gyártóinak bizonyítaniuk kell,hogy eszközeiknek nincs citotoxikus hatása.
👉 Mik azok a kvantitatív citotoxicitási vizsgálatok (MMT citotoxicitásivizsgálat)?
Az eszközök biokompatibilitását érintő szabványok (ANSI/AAMI/ISO10993–5:2009) újabb változatai szerint a kvalitatív citotoxicitási tesztekalkalmasak a kockázatok nagyságrendi besorolására, de a kvantitatívértékelést részesítik előnyben.
✅ MTT-vizsgálat: Ez a kvantitatív módszer egy 3-(4,5-dimetiltiazol-2-il)-2,5-difeniltetrazólium-bromid nevű festéket használ—amit MTT-nek rövidítünk.Ez a festékanyag egy sárga, vízben oldható vegyszer, amit a mitokondriálisszukcinát-dehidrogenáz felhasít és így lila színű formazán alakul belőle. AzMTT-vizsgálathoz a tesztelendő anyag kivonatát használjuk. A sejtekhez 24órára MTT-t adunk, hogy az ibolyaszínű formazán jelenlétét detektálhassukegy megfelelő leolvasó berendezéssel.
Az MTT a következő esetekben alkalmazható a citotoxicitás értékelésére:
✔️ Orvostechnikai eszközökből kivonódó anyagok
✔️ Toxikus anyagok
✔️ Környezeti méreg-és szennyezőanyagok
✔️ Hematológiai rákos megbetegedésekben szenvedő betegekgyógyszerérzékenységi profiljának meghatározásában és a lehetségeskemoterápiás gyógyszerek elsődleges szűrésében.
👉 Hogyan épül fel a Citotoxicitás vizsgálata?
A citotoxicitási vizsgálat 3 lépésből áll:
1️⃣ Extrakció: Az eszközt extrakciós közegbe merítik, és egy inert edénybenmeghatározott ideig, előre meghatározott hőmérsékleten és előremeghatározott arányban extrahálják.
2️⃣ Inkubáció: A kivonatot az extrakció után a sejtekkel együtt inkubáljuk.Erre a célra számos módszer alkalmazható: a sejteket előinkubálhatjuk(előtenyészthetjük) kivonat nélkül, vagy a sejtek mellett termeszthetjük.
3️⃣ Értékelés: Az inkubáció után a kivonat citotoxicitásra gyakorolt hatásátszubkonfluens (80%-os konfluencia) sejtgyepen értékelik. Kvalitatív vagykvantitatív értékelést végeznek.
👉 Mik azok a kvalitatív citotoxicitási vizsgálatok?
Általában három kvalitatív citotoxicitási vizsgálatot végeznek el azorvostechnikai eszközök esetében.
Direkt kontaktusos vizsgálat: Az eljárás során a vizsgált minta egy darabjáta táptalajon növekvő sejtekre helyezik, amelyeket ezután inkubálnak. Azinkubációs időszak alatt a vizsgálati mintákban lévő kioldódó vegyianyagok behatolhatnak atáptalajba, és érintkezésbe kerülhetnek asejtréteggel. A vizsgálati minta reaktivitását a mintát körülvevő sejtekdegenerációja, malformációja és lízise jelzi.
Indirekt kontaktusos agar diffúziós vizsgálat: Ezzel a módszerrel atenyésztett sejtek fölé egyvékony táptalajt, agarréteget helyeznek. Avizsgálati mintát az agarréteg tetejére helyezzük, majd inkubáljuk. Avizsgálati anyag akkor jelzi a citotoxicitást, ha a lizált sejtek zónája vagy adegeneratív zóna rendellenes.
MEM kimosási vizsgálat: A vizsgálati módszer során különböző extrakciósközegeket és beállításokat alkalmaznak az eszközök valós körülményekközötti tesztelésére vagy az ilyen körülmények eltúlzására. Azextraktumokat egy sejtrétegre viszik át, amelyet ezután inkubálnak. Asejteket az inkubáció után mikroszkópos vizsgálatnak vetik alá adeformáció, degeneráció és lízis kimutatására.
✅ Az eszközök biokompatibilitását érintő szabványok (ANSI/AAMI/ISO10993–5:2009) újabb változatai szerint a kvalitatív citotoxicitási tesztekalkalmasak a kockázatok nagyságrendi besorolására, de a kvantitatívértékelést részesítik előnyben (MMT citotoxicitási vizsgálat).
🎯 Ha többet szeretne megtudni az ISO 10993 szerinti citotoxicitásvizsgálattal kapcsolatos szolgáltatásainkról, keresse fel a www.medistri.swiss honlapunkat,vagy vegye fel a kapcsolatotközvetlenül a munkatársainkkal a contact@medistri.swiss címen.
- A Medistri csapata
#Medistri